1985年首次在电影《二子开店》中参加演出。1986年因拍摄《无悔追踪》而走红 。 1987年调到北京军区战友话剧团。1996年调入中央实验话剧院，国家一级演员。1997年因在《离开雷锋的日子》中扮演了乔安山一角而获得关注。2000年主演电视剧《大宅门》，饰演三爷 。2004年出演袁军导演的电视连续剧《红色娘子军》，饰演反面角色 。2013年首次担任导演兼主演温情励志剧《幸福相依》。2014年与陈道明、巩俐等主演张艺谋执导的电影《归来》 。2016年3月18日，刘佩琦主演原创话剧《杜甫》在国家话剧院剧场演出。2016中国CHO公益歌曲《展翅翱翔》发布会在北京举办。知名艺人金波、北京电视台主持人蔡蔡担纲主持，表演艺术家刘佩琦，歌唱家李丹阳，相声演员方清平，歌手西单女孩任月丽，《华语音乐排行榜》创始人合力，阿里音乐COO俞晓冬等数十位嘉宾出席。
公益歌曲《展翅翱翔》由刘佩琦、李丹阳、合力、何静、方清平等联合启动，该歌曲著作人张坤担任总策划，合力担任总导演。为突显该歌曲公益性，让贫困地区儿童的梦想不因贫穷而夭折，来自不同领域的多位爱心人士与表演艺术家共同推动“展翅翱翔公益基金”的筹备，让更多社会力量参与到支持贫困地区“儿童梦想圆梦行动”中，随着《展翅翱翔》的正式发布，齐国利、杨舒涵等艺术家也捐献了他们的作品。
在随后举办的中国CHO发展论坛上，中国人民大学劳动人事学院教授、华夏基石管理咨询集团董事长彭剑锋，中国人民大学劳动人事学院周文霞教授，婷美集团CEO农家庆，北京奥美集团总裁彭丽华就“新旧碰撞，互联网+与+互联网”的主题进行了探讨。以“跨界融合，你中有我，我中有你”为主题的圆桌论坛上，阿里音乐COO 俞晓冬、大街网CEO王秀娟等也剖析了利用跨界融合促进企业可持续发展的规律和经验。